• +7 (495) 232-34-17

ДНК-идентификация животных

Среди задач, которые ставятся перед экспертно-криминалистическими подразделениями правоохранительными органами, можно выделить достаточно обширную группу вопросов, связанных с расследованием экологических преступлений в целом и по делам, связанным с незаконной охотой, в частности.

В ряде случаев, незаконная охота может быть квалифицирована как преступление, ответственность за совершение которого предусмотрена ст. 258 УК РФ.

Наиболее распространенными криминалистическими объектами и следами, в случаях расследования такого рода преступлений, являются части трупа животного, следы крови животного на одежде преступника, средствах транспортировки, инструментах, используемых для разделки туш и т.п. Основными задачами, возникающими в процессе предварительного, являются: установление принадлежности изъятых биологических следов и объектов конкретному виду животного, установление его половой принадлежности, установление количества особей животного и принадлежности биологических следов конкретной особи. На сегодняшний день наиболее эффективным методом, позволяющим решать указанные задачи, является метод молекулярно-генетического анализа ДНК.

ДНК-анализ биологических следов диких животных является более сложным экспертным исследованием, чем ДНК-анализ биологических следов человека, это связано с решением дополнительных задач, обусловленных филогенетическим родством диких видов животных между собой и с домашними животными (см. рис. 1).

Рис. 1. Схема систематической классификации животных отряда Парнокопытные, являющихся предметом незаконной охоты


Алгоритм исследования биологических образцов, начинается с решения задач классификационного типа: установления семейства, установление вида животного (исходя из объектов незаконной охоты это представители подотряда Жвачных Парнокопытных, таких как лось, олень, косуля, дикий кабан, зубр); а также дифференциации образца по принадлежности дикому или домашнему животному. Заканчивается исследование установлением половой принадлежности животного (самка - самец) и идентификацией конкретной особи по биологическим следам.

Этапы непосредственно экспертного исследования по видовой дифференциации и идентификации особей животного происхождения соответствуют полному циклу исследования ДНК человека, а именно: выделение ДНК, оценка выделенного препарата ДНК, амплификация исследуемых локусов ДНК, разделение фрагментов методом капиллярного электрофореза и анализ полученных данных.

В качестве комплексного решения для выполнения экспертных исследований по делам рассматриваемой направленности мы предлагаем линейку криминалистических средств и методов как собственного производства, так и продукцию наших белорусских партнеров в лице компании «АМГен Бел» и Института биоорганической химии НАН Беларуси.

 Для качественного и высокоэффективного этапа выделения ДНК, учитывая разнородный характер объектов исследования, предлагаем универсальный набор реагентов для экспресс выделения «ИмпульсСтарт-Объект», протокол которого предполагает минимум ручных манипуляций и исключает стадии очистки выделенной ДНК. Процесс выделения с применением данной продукции занимает 45 минут, а полученный лизат готов к дальнейшему исследованию.

Для этапа оценки проб ДНК, выделенных из объектов животного происхождения, предлагаем использовать набор реагентов «AMGene Artiodactyla Quant» (производитель «АМГен Бел», Республика Беларусь), предназначенный для определения тотальной концентрации выделенной ДНК в пробах методом постановки ПЦР в режиме реального времени с использованием приборной базы, имеющейся в большинстве экспертных подразделений (7500 Real-Time PCR System и Quantstudio 5 Real-Time PCR System).

Данный набор призван решить проблемы, связанные как с избыточным внесением ДНК в реакцию амплификации, что приводило к повторной постановке ПЦР, дополнительному электрофорезу, а также трудностям при анализе полученных «перегруженных» данных, так и с отсутствием необходимости исследования проб, не содержащих достаточное количество выделенной ДНК.


Рис.2 Данные анализа проб ДНК, выделенных из образов тканей животных отряда Парнокопытные с использованием набора «AMGene Artiodactyla Quant».

 Для проведения видовой дифференциации исследуемых образцов мы предлагаем к использованию набор реагентов «Artiodactyla Diff-PLEX» (производитель Институт биоорганической химии НАН Беларуси, г.Минск). Данная тест-система предназначена для дифференциации биологических образцов диких животных семейства Оленевые – лося (род Alces), косули (род Capreolus), оленя (род Cervus), и домашних животных семейства Полорогие – крупного рогатого скота (род Bos), козы (род Capra), овцы (род Ovis). Для рода косули (род Capreolus) возможна дифференциация биологических образцов Косули европейской (Capreolus capreolus) и сибирской (Capreolus pygargus). Набор имеет стандартную комплектацию для наборов, предназначенных для типирования STR-локусов, и рассчитан на проведение 50 анализов (при объеме реакционной смеси 10 мкл), включая контрольные образцы.


Рис 3. Электрофореграмма результатов генотипирования ДНК лося с использованием набора «Artiodactyla Diff-PLEX».

Для дальнейшего исследования с целью идентификации конкретной особи животного, в зависимости от её видовой принадлежности, установленной на предыдущем этапе, необходимо использовать видоспецифичные наборы для амплификации STR-локусов. В настоящее время предлагаем к использованию наборы реагентов, производства компании «АМГен Бел» и Института биоорганической химии НАН Беларуси, а именно:

- «Alces ID-Plex» и «Alces ID-Plex Light» (для идентификации особей животных вида Лось европейский (Аlces alces) по 20 и 14 STR-локусам, соответственно),;

- «Capreolus ID-PLEX» ( для идентификации особей вида Косуля европейская С. Сapreolus по 19 локусам);

- «Cervus ID-PLEX» ( для идентификации особей животного рода Олени (Cervus sp.) по 19 маркерам);

- «AMGene CPG ID-plex» (для идентификации особей животных вида Косуля сибирская (Capreolus pygargus) по 14 STR-локусам);

- «AMGene Cattle-plex» (для идентификации особей животных, относящихся к крупному рогатому скоту (Bos taurus) по 17 локусам).

Для частных случаев экспертно-криминалистической деятельности мы также предлагаем использовать набор «SF Cannine 17A STR Kit», производства Sorenson Forensic (КНР), предназначенный для идентификации животных вида Собака домашняя Canis familiaris по 16 локусам.

 

Рис.4 Фрагмент электрофореграммы ДНК Сибирской Косули (Capreólus pygárgus (выделение из мягкой ткани набором «ИмпульсСтарт-Объект», определение концентрации набором «AMGene Artiodactyla Quant» (171,7 нг/мкл), апмлификация набором «AMGene CPG ID-plex» (проба нормализована до 1 нг/мкл), капиллярный электрофорез в среде полимера «Восток-4» на генетическом анализаторе «AB 3500», анализ программным обеспечением GM v. 1.4.

Анализ данных, получаемых в ходе электрофореза амплифицированных с использованием вышеуказанных наборов проб, проводится на стандартном программном обеспечение с применением традиционных методологических подходов.



Заявка на товар или подробную консультацию

Отправьте заявку прямо сейчас и получите самое выгодное предложение